Desenvolvimento e validação de metodologia analítica para análise da fração acetato de etila do extrato da casca do caule de Anacardium occidentale Linn por cromatografia líquida de alta eficiência

Anacardium occidentale Linn is a tree native to Brazil, popularly known as cashew. Studies show that the Ethyl Acetate fraction (EtOAc) obtained from the acetone:water extract of the A. occidentale stem bark has anti-inflammatory activity, suggesting tannins as responsible for this action. As one of...

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Detalhes bibliográficos
Autor principal:	Souza, Graziene Lopes de
Outros Autores:	Raffin, Fernanda Nervo
Formato:	Dissertação
Idioma:	por
Publicado em:	Brasil
Assuntos:	Anacardium occidentale Cromatografia líquida de alta eficiência Metodologia analítica Validação Controle de qualidade CNPQ::CIENCIAS DA SAUDE::FARMACIA
Endereço do item:	https://repositorio.ufrn.br/jspui/handle/123456789/21988
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description	Anacardium occidentale Linn is a tree native to Brazil, popularly known as cashew. Studies show that the Ethyl Acetate fraction (EtOAc) obtained from the acetone:water extract of the A. occidentale stem bark has anti-inflammatory activity, suggesting tannins as responsible for this action. As one of 71 species of the National List of Medicinal Plants of Interest to the Unified Health System (RENISUS), it is important that analytical methodologies for the study of its constituents are developed. In this context, the High Performance Liquid Chromatography (HPLC) is a method of importance to the analysis of samples of plant origin. This study aimed to develop and validate an analytical methodology by HPLC for analysis of EtOAc fraction of acetone:water extract from the stem bark of A. occidentale. The chromatographic conditions were established using acetic acid 0.3% (v/v in water) and acetonitrile as the mobile phase. As a starting point for the development of chromatographic procedures, exploratory gradient was used, which allows to analyze all polarity groups. The gradient elution was then adjusted to obtain a chromatogram with adequate separation and satisfactory chromatographic parameters. For identification of the compounds, the pattern analysis was carried out, and by observing the retention times and absorption spectra of the substances was possible to choose those which would be present in the sample. It could suggest the presence of catechin, epicatechin, epigallocatechin and gallic acid in the EtOAc fraction of A. occidentale. To validate the method, linearity tests were performed, precision, accuracy, robustness, limits of detection and quantification. According to Resolution 899/2003 (ANVISA), the method was assessed to be linear, precise and accurate for the studied compounds. Among the changed analysis conditions for studying the robustness of the method, when the column temperature was 35°C analysis did not present robustness for gallic acid, but when other conditions were changed it did not promote statistically significant changes to this analyte. It follows that the chromatographic method is suitable for analysis of gallic acid, catechin and epicatechin in EtOAc fraction of the acetone:water extract of the A. occidentale.
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As one of 71 species of the National List of Medicinal Plants of Interest to the Unified Health System (RENISUS), it is important that analytical methodologies for the study of its constituents are developed. In this context, the High Performance Liquid Chromatography (HPLC) is a method of importance to the analysis of samples of plant origin. This study aimed to develop and validate an analytical methodology by HPLC for analysis of EtOAc fraction of acetone:water extract from the stem bark of A. occidentale. The chromatographic conditions were established using acetic acid 0.3% (v/v in water) and acetonitrile as the mobile phase. As a starting point for the development of chromatographic procedures, exploratory gradient was used, which allows to analyze all polarity groups. The gradient elution was then adjusted to obtain a chromatogram with adequate separation and satisfactory chromatographic parameters. For identification of the compounds, the pattern analysis was carried out, and by observing the retention times and absorption spectra of the substances was possible to choose those which would be present in the sample. It could suggest the presence of catechin, epicatechin, epigallocatechin and gallic acid in the EtOAc fraction of A. occidentale. To validate the method, linearity tests were performed, precision, accuracy, robustness, limits of detection and quantification. According to Resolution 899/2003 (ANVISA), the method was assessed to be linear, precise and accurate for the studied compounds. Among the changed analysis conditions for studying the robustness of the method, when the column temperature was 35°C analysis did not present robustness for gallic acid, but when other conditions were changed it did not promote statistically significant changes to this analyte. It follows that the chromatographic method is suitable for analysis of gallic acid, catechin and epicatechin in EtOAc fraction of the acetone:water extract of the A. occidentale. Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) Anacardium occidentale Linn é uma árvore nativa do Brasil, popularmente conhecida como cajueiro. Estudos mostram que a fração Acetato de Etila (AcOEt) obtida a partir do extrato acetona das cascas do caule de A. occidentale apresenta atividade anti-inflamatória, sugerindo-se os taninos como responsáveis por essa ação. Sendo uma das 71 espécies da Relação Nacional de Plantas Medicinais de Interesse ao Sistema Único de Saúde (RENISUS), é importante que sejam desenvolvidas metodologias analíticas para o estudo dos seus constituintes. Nesse contexto, a Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE) constitui uma metodologia de importância para a análise de amostras de origem vegetal. Este estudo teve como objetivo desenvolver e validar uma metodologia analítica por CLAE para a análise da fração AcOEt do extrato acetona das cascas do caule de A. occidentale. As condições cromatográficas foram estabelecidas utilizando como fase móvel ácido acético a 0,3% e acetonitrila. Como ponto de partida para o desenvolvimento do método cromatográfico, foi utilizado um gradiente exploratório, que permite analisar todas as faixas de polaridade. O gradiente de eluição foi então ajustado até a obtenção de um cromatograma com adequada separação e parâmetros cromatográficos satisfatórios. Para a identificação dos compostos, foi realizada a análise de padrões e, pela observação dos tempos de retenção e espectros de absorção das substâncias, foi possível eleger as que estariam presentes na amostra. Foi possível sugerir a presença de catequina, epicatequina, epigalocatequina e ácido gálico na fração AcOEt de A. occidentale. Para a validação do método, foram realizados os testes de linearidade, precisão, exatidão, robustez, limites de detecção e quantificação. O método foi avaliado como sendo linear, preciso e exato para os compostos estudados. Dentre as condições de análise alteradas para o estudo da robustez, o método não apresentou robustez para a análise do ácido gálico, quando a temperatura da coluna foi de 35ºC, mas as demais condições alteradas não promoveram mudanças estatisticamente significativas para este analito. Conclui-se que o método cromatográfico é adequado para a análise da fração AcOEt do extrato acetona de A. occidentale. 2017-02-14T21:07:26Z 2017-02-14T21:07:26Z 2015-06-26 masterThesis SOUZA, Graziene Lopes de. Desenvolvimento e validação de metodologia analítica para análise da fração acetato de etila do extrato da casca do caule de Anacardium occidentale Linn por cromatografia líquida de alta eficiência . 2015. 91f. Dissertação (Mestrado em Ciências Farmacêuticas) - Centro de Ciências da Saúde, Universidade Federal do Rio Grande do Norte, Natal, 2015. https://repositorio.ufrn.br/jspui/handle/123456789/21988 por Acesso Aberto application/pdf Brasil UFRN PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM CIÊNCIAS FARMACÊUTICAS

Desenvolvimento e validação de metodologia analítica para análise da fração acetato de etila do extrato da casca do caule de Anacardium occidentale Linn por cromatografia líquida de alta eficiência

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