Análise das mudanças no perfil protéico durante o estresse oxidativo in vivo e atuação da muty-glicosilase em respostas celulares/

Resumo:Espécies reativas de oxigênio (EROs) são produtos do metabolismo celular capazes de reagir com biomoléculas, como proteínas, lipídeos e ácido nuc1éico. Essas reações podem causar modificações deletérias para a célula. Fotossensibilizadores como o azul de metileno (MB), são capazes de produzir...

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Principais autores: Oliveira, Ana Helena Sales de., Agnez-Lima, Lucymara Fassarella., Uchôa, Adriana F.
Formato: Dissertação
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Endereço do item:https://repositorio.ufrn.br/bitstream/123456789/16771/1/AnaHSO.pdf
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spelling oai:localhost:123456789-838342022-11-30T10:56:59Z Análise das mudanças no perfil protéico durante o estresse oxidativo in vivo e atuação da muty-glicosilase em respostas celulares/ Oliveira, Ana Helena Sales de. Agnez-Lima, Lucymara Fassarella. Uchôa, Adriana F. Mutagênese - Dissertação. Reparo de DNA - Dissertação. Estresse oxidativo - Dissertação. Proteoma - Dissertação. Muty-glicosilase - Dissertação. Oxigênio singlete - Dissertação. Mutagenesis. DNA repair. Oxidative stress. Proteomic. MutY-glycosylase. Singlet oxygen. Resumo:Espécies reativas de oxigênio (EROs) são produtos do metabolismo celular capazes de reagir com biomoléculas, como proteínas, lipídeos e ácido nuc1éico. Essas reações podem causar modificações deletérias para a célula. Fotossensibilizadores como o azul de metileno (MB), são capazes de produzir EROs, como o oxigênio singlete (102), uma das formas mais reativas do oxigênio mo lecu lar. O 102 é capaz de oxidar guaninas, gerando lesões no DNA, como 7,8-dihydro-8-oxoguanine (8-oxoG), o mais frequente produto da oxidação, que durante a replicação pode emparelhar com adenina levando à mutações. Foi de interesse desse estudo, caracterizar a citotoxicidade, o potencial mutagênico e o padrão de expressão protéica, durante o estresse oxidativo induzido pelo MB, usando como modelo cepas de Escherichia coli proficiente em reparo e deficientes em MutY -Glicosilase, uma enzima de reparo envolvida na correção de pares 8-oxoG:Adenina. Essas cepas foram tratadas com MB em presença ou ausência de luz. O crescimento, sobrevivência, a taxa de mutagênese e padrão de síntese protéica, foram analisados. O tratamento afetou o crescimento bacteriano, induzindo morte celular, mutagênese, e mudanças no padrão de síntese protéica em ambas as cepas. Entretanto a cepa deficiente em MutY mostrou uma maior sensibilidade em relação a cepa proficiente. Adicionalmente, a cepa deficiente em MutY apresentou um padrão de expressão protéica diferenciado quando comparado com a cepa proficiente. Esses resultados sugerem o envolvimento da MutY na correção de lesões de DNA não caracterizadas e que a ausência de MutY induz alterações no padrão de expressão protéica.#$&Abstract:Reactive oxygen species (ROS) are cellular metabolism by-products that are able to react with biomolecules, such as proteins, lipids and nucleic acids. These reactions can cause deleterious modifications to cell. Photosensitizers like methylene blue (MB) may produce ROS, such as singlet oxygen (102), one of the most reactive forros of molecular oxygen. The 102 carries out the oxidation of guanines, inducing DNA damage, such as 7,8-dihydro-8-oxoguanine (8-oxoG), the most ffequent oxidation product, that during replication may misspair with adenine leading to mutations. The aim of this study was to characterize the citotoxicity, the mutagenic potential and the pattem of proteins expression during oxidative stress induced by MB, using as mo deI Escherichia coli proficient strains and deficient in MutY -glycosylases, a DNA repair enzyme involved in the correction of 8¬oxoG:Adenine misspair. These strains were treated with MB plus light or kept in the dark. The growth, survival, mutagenesis rate and protein synthesis pattems were analyzed. The treatment affected bacterial growth, inducing celi death, mutagenesis, and changes in the protein synthesis pattems in both E. coli strains. However, the MutY deficient strain showed a higher sensibility than the proficient one. Additionaly, the MutY deficient strain showed different expressed protein pattems when compared with proficient strain. Taken ali together, theses results suggest the involvement ofMutY in the correction ofuncharacterized lesions and that its absence induces changes in the pattem of protein expression. 1 2022-10-05T20:07:39Z 2022-10-05T20:07:39Z 2009. Dissertação 575.224.4 O48a DISSERT 118314 https://repositorio.ufrn.br/bitstream/123456789/16771/1/AnaHSO.pdf https://repositorio.ufrn.br/bitstream/123456789/16771/1/AnaHSO.pdf
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Oliveira, Ana Helena Sales de.
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Análise das mudanças no perfil protéico durante o estresse oxidativo in vivo e atuação da muty-glicosilase em respostas celulares/
description Resumo:Espécies reativas de oxigênio (EROs) são produtos do metabolismo celular capazes de reagir com biomoléculas, como proteínas, lipídeos e ácido nuc1éico. Essas reações podem causar modificações deletérias para a célula. Fotossensibilizadores como o azul de metileno (MB), são capazes de produzir EROs, como o oxigênio singlete (102), uma das formas mais reativas do oxigênio mo lecu lar. O 102 é capaz de oxidar guaninas, gerando lesões no DNA, como 7,8-dihydro-8-oxoguanine (8-oxoG), o mais frequente produto da oxidação, que durante a replicação pode emparelhar com adenina levando à mutações. Foi de interesse desse estudo, caracterizar a citotoxicidade, o potencial mutagênico e o padrão de expressão protéica, durante o estresse oxidativo induzido pelo MB, usando como modelo cepas de Escherichia coli proficiente em reparo e deficientes em MutY -Glicosilase, uma enzima de reparo envolvida na correção de pares 8-oxoG:Adenina. Essas cepas foram tratadas com MB em presença ou ausência de luz. O crescimento, sobrevivência, a taxa de mutagênese e padrão de síntese protéica, foram analisados. O tratamento afetou o crescimento bacteriano, induzindo morte celular, mutagênese, e mudanças no padrão de síntese protéica em ambas as cepas. Entretanto a cepa deficiente em MutY mostrou uma maior sensibilidade em relação a cepa proficiente. Adicionalmente, a cepa deficiente em MutY apresentou um padrão de expressão protéica diferenciado quando comparado com a cepa proficiente. Esses resultados sugerem o envolvimento da MutY na correção de lesões de DNA não caracterizadas e que a ausência de MutY induz alterações no padrão de expressão protéica.#$&Abstract:Reactive oxygen species (ROS) are cellular metabolism by-products that are able to react with biomolecules, such as proteins, lipids and nucleic acids. These reactions can cause deleterious modifications to cell. Photosensitizers like methylene blue (MB) may produce ROS, such as singlet oxygen (102), one of the most reactive forros of molecular oxygen. The 102 carries out the oxidation of guanines, inducing DNA damage, such as 7,8-dihydro-8-oxoguanine (8-oxoG), the most ffequent oxidation product, that during replication may misspair with adenine leading to mutations. The aim of this study was to characterize the citotoxicity, the mutagenic potential and the pattem of proteins expression during oxidative stress induced by MB, using as mo deI Escherichia coli proficient strains and deficient in MutY -glycosylases, a DNA repair enzyme involved in the correction of 8¬oxoG:Adenine misspair. These strains were treated with MB plus light or kept in the dark. The growth, survival, mutagenesis rate and protein synthesis pattems were analyzed. The treatment affected bacterial growth, inducing celi death, mutagenesis, and changes in the protein synthesis pattems in both E. coli strains. However, the MutY deficient strain showed a higher sensibility than the proficient one. Additionaly, the MutY deficient strain showed different expressed protein pattems when compared with proficient strain. Taken ali together, theses results suggest the involvement ofMutY in the correction ofuncharacterized lesions and that its absence induces changes in the pattem of protein expression.
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