Avaliação da mutagenicidade do decocoto das cascas da Aroeira (Schinus terebinthifolius Raddi)/

Resumo: A solução extrativa (decocto) das cascas do caule da aroeira (Schinus terebinthifolius Raddi) é amplamente usada pela população nordestina como antiinflamatório e cicatrizante. Além disso, é também objeto de pesquisas no âmbito da UFRN, no desenvolvimento de preparações farmacêuticas de uso...

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Principais autores: Carvalho, Maria Cleide Ribeiro Dantas de., Medeiros, Sílvia Regina Batistuzzo de., Universidade Federal do Rio Grande do Norte.
Formato: Dissertação
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description Resumo: A solução extrativa (decocto) das cascas do caule da aroeira (Schinus terebinthifolius Raddi) é amplamente usada pela população nordestina como antiinflamatório e cicatrizante. Além disso, é também objeto de pesquisas no âmbito da UFRN, no desenvolvimento de preparações farmacêuticas de uso tópico. Como o Ministério da Saúde estabeleceu normas para o registro, comprovação da eficácia e testes de toxicidade, dentre os quais a avaliação da mutagenicidade para produtos fitoterápicos (Portaria nº 116/96-SVS-MS e Resolução nº 17/00-ANVS-MS), e em vistas da aplicabilidade desse decocto, resssalta-se a importância da avaliação do seu potencial mutagênico. Para tal, foram realizados testes com DNA plasmidial e em sistemas bacterianos. Em nenhum dos testes realizados foi empregada a mistura de ativação metabólica S9, em virtude desse tipo de preparação se restringir ao uso tópico. O teste com o DNA plasmidial não revelou a presença de quebras significativas nas ligações fosfodiéster do pB1 KS. Porém, nos testes bacterianos utilizados, o decocto mostrou-se citotóxico e mutagênico. No SOS Cromoteste, o decocto induziu com a mesma intensidade o sistema SOS das linhagens-teste PQ35 e PQ37, sugerindo que as lesões formadas no DNA não são substrato pra o sistema UvrABC. O teste de citotoxicidade, usando as linhagens CC104 e a CCI04mutMmutY. demonstrou queda significativa da sobrevivência bacteriana, sendo esta mais intensa na linhagem CC104mutMmutY, sugerindo que lesões letais, induzidas pelo decocto, estejam sendo formadas no DNA e que o acúmulo das lesões oxidativas não reparadas na duplo-mutante a torne mais vulnerável a essas lesões. O teste de mutação direta com as linhagens CC104 e CC104mutMmutY, usando como alvo de mutação o gene rpoB e selecionando mutantes com a rifampicina, demonstrou#$&um aumento signficativo da freqüência de mutação na CC104mutMmutY, sugerindo que as lesões oxidativas geradas e não reparadas pela linhagem deficiente em reparo oxidativo, tenham se refletido em mutações por substituição de pares de base de sentido trocado. O teste de mutação reversa (teste de Ames) foi positivo para as linhagens TA100 e T1102 (as quais detectam mutações por substituição de pares de base de sentido trocado), indicam dois tipos específicos de eventos mutacionais GC ->AT (TA100) e AT->GC (TA102), nas concentrações de 1,2 mg/placa, 1,8 mg/placa e 2,4 mg/placa. Entretanto, não se pode descartar a possibilidade de que outros eventos mutacionais possam ter ocorrido, visto que o espectro de mutações por substituição de bases possíveis de ocorrer no gene rpoB é extremamente amplo. Como os flavonóides presentes no decocto da aroeira possuem as condições estruturais para o estabelecimento de atividade mutagênica, pode-se supor que tais compostos estejam envolvidos na indução da mutagenicidade observada nos testes bacterianos utilizados. Dessa forma, os dados sugerem, através dos testes empregados, uma atividade citotóxica e mutagênica do decocto da aroeira nas concentrações utilizadas.#$&Abstract: The abstract solution (decoction) of stem barks of pepper tree (Schimus Terebinthifolis), Raddi ) is widely utilized by the northeastern population as anti-inflammatory and cicatrizer . It is also subjetc of research in the UFRN for the development of pharmaceutical preparations for topical use. The Ministry of health has established directions of registration, confirmation of effecacy, and toxicity tests, among which the evalution of mutagenicity of phytotherapeutical productus (Regulation n. 116/96-SVS-NS and resolution n. 17/00-ANVS-MS), and in view of that decoction applicability, one points out th importance of evaluating its mutagenic potential. For that purpouse, test with plasmid DNA and in bacterial systems were made. The s9 mix was not used in any of the test made, because that kind of preparation is for topical use. The plasmid DNA test did not produce any significant breakage in the pB1 KS phosphodiester chains. However, the decotion proved to be cytotoxic and mutagenic in the bacterial tests. In the SOS Chromotest the decoction induced the SOS system of PQ35 and PQ37 tet strains with pratically the same intensity, which suggests that the DNA lesions are not substract for the UvrABC system. The cytotoxicity test with CC104 and CC104mutMmuty strains showed a decline of bactery survival, which chiefly occurend with the latter. This suggests that decoction-induced lethal lesion are beging produce in the DNA and that the accumulation of nonrepaired oxidative lesions in the double-mutant make it more vulnerable to such lesions. The foward mutation test with CC104 and CC104mutMmuty strains, using the rpoB gene as target and selecting mutants with rifampicin, demostrated a signifant increase of mutation frequency in CC104nutMuty, wich suggests that oxidative lesions generated and not conveniently repaired by the oxidative repair lacking strain have turned into missense mutations. The reverse mutation test (aMES TEST) WAS POSITIVE TO TA100
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Como o Ministério da Saúde estabeleceu normas para o registro, comprovação da eficácia e testes de toxicidade, dentre os quais a avaliação da mutagenicidade para produtos fitoterápicos (Portaria nº 116/96-SVS-MS e Resolução nº 17/00-ANVS-MS), e em vistas da aplicabilidade desse decocto, resssalta-se a importância da avaliação do seu potencial mutagênico. Para tal, foram realizados testes com DNA plasmidial e em sistemas bacterianos. Em nenhum dos testes realizados foi empregada a mistura de ativação metabólica S9, em virtude desse tipo de preparação se restringir ao uso tópico. O teste com o DNA plasmidial não revelou a presença de quebras significativas nas ligações fosfodiéster do pB1 KS. Porém, nos testes bacterianos utilizados, o decocto mostrou-se citotóxico e mutagênico. No SOS Cromoteste, o decocto induziu com a mesma intensidade o sistema SOS das linhagens-teste PQ35 e PQ37, sugerindo que as lesões formadas no DNA não são substrato pra o sistema UvrABC. O teste de citotoxicidade, usando as linhagens CC104 e a CCI04mutMmutY. demonstrou queda significativa da sobrevivência bacteriana, sendo esta mais intensa na linhagem CC104mutMmutY, sugerindo que lesões letais, induzidas pelo decocto, estejam sendo formadas no DNA e que o acúmulo das lesões oxidativas não reparadas na duplo-mutante a torne mais vulnerável a essas lesões. O teste de mutação direta com as linhagens CC104 e CC104mutMmutY, usando como alvo de mutação o gene rpoB e selecionando mutantes com a rifampicina, demonstrou#$&um aumento signficativo da freqüência de mutação na CC104mutMmutY, sugerindo que as lesões oxidativas geradas e não reparadas pela linhagem deficiente em reparo oxidativo, tenham se refletido em mutações por substituição de pares de base de sentido trocado. O teste de mutação reversa (teste de Ames) foi positivo para as linhagens TA100 e T1102 (as quais detectam mutações por substituição de pares de base de sentido trocado), indicam dois tipos específicos de eventos mutacionais GC ->AT (TA100) e AT->GC (TA102), nas concentrações de 1,2 mg/placa, 1,8 mg/placa e 2,4 mg/placa. Entretanto, não se pode descartar a possibilidade de que outros eventos mutacionais possam ter ocorrido, visto que o espectro de mutações por substituição de bases possíveis de ocorrer no gene rpoB é extremamente amplo. Como os flavonóides presentes no decocto da aroeira possuem as condições estruturais para o estabelecimento de atividade mutagênica, pode-se supor que tais compostos estejam envolvidos na indução da mutagenicidade observada nos testes bacterianos utilizados. Dessa forma, os dados sugerem, através dos testes empregados, uma atividade citotóxica e mutagênica do decocto da aroeira nas concentrações utilizadas.#$&Abstract: The abstract solution (decoction) of stem barks of pepper tree (Schimus Terebinthifolis), Raddi ) is widely utilized by the northeastern population as anti-inflammatory and cicatrizer . It is also subjetc of research in the UFRN for the development of pharmaceutical preparations for topical use. The Ministry of health has established directions of registration, confirmation of effecacy, and toxicity tests, among which the evalution of mutagenicity of phytotherapeutical productus (Regulation n. 116/96-SVS-NS and resolution n. 17/00-ANVS-MS), and in view of that decoction applicability, one points out th importance of evaluating its mutagenic potential. For that purpouse, test with plasmid DNA and in bacterial systems were made. The s9 mix was not used in any of the test made, because that kind of preparation is for topical use. The plasmid DNA test did not produce any significant breakage in the pB1 KS phosphodiester chains. However, the decotion proved to be cytotoxic and mutagenic in the bacterial tests. In the SOS Chromotest the decoction induced the SOS system of PQ35 and PQ37 tet strains with pratically the same intensity, which suggests that the DNA lesions are not substract for the UvrABC system. The cytotoxicity test with CC104 and CC104mutMmuty strains showed a decline of bactery survival, which chiefly occurend with the latter. This suggests that decoction-induced lethal lesion are beging produce in the DNA and that the accumulation of nonrepaired oxidative lesions in the double-mutant make it more vulnerable to such lesions. The foward mutation test with CC104 and CC104mutMmuty strains, using the rpoB gene as target and selecting mutants with rifampicin, demostrated a signifant increase of mutation frequency in CC104nutMuty, wich suggests that oxidative lesions generated and not conveniently repaired by the oxidative repair lacking strain have turned into missense mutations. The reverse mutation test (aMES TEST) WAS POSITIVE TO TA100 2 2022-10-05T12:07:44Z 2022-10-05T12:07:44Z 2000. Dissertação 575:61 C331a DISSERT 56469 https://app.bczm.ufrn.br/home/#/item/56469 https://app.bczm.ufrn.br/home/#/item/56469