Heparina e dermatam sulfato da lagosta Panulirus laevicauda /
Resumo : Os GAG extraídos da lagosta Panulirus laevicauda foram obtidos das frações R2 e R3 após proteólise dos tecidos, complexação com resina de troca iônica, e posterior eluição com NaCl 2,0M e 3,0M, respectivamente. Os GAGS existentes nas frações foram separados por precipitação sequencial com a...
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oai:localhost:123456789-298262022-11-29T18:29:18Z Heparina e dermatam sulfato da lagosta Panulirus laevicauda / Silva, Luciana Pereira da. Chavante, Suely Ferreira. Universidade Federal do Rio Grande do Norte. Heparina Glicosaminoglicanos Dissertação Lagosta (Panulirus laevicauda) Resumo : Os GAG extraídos da lagosta Panulirus laevicauda foram obtidos das frações R2 e R3 após proteólise dos tecidos, complexação com resina de troca iônica, e posterior eluição com NaCl 2,0M e 3,0M, respectivamente. Os GAGS existentes nas frações foram separados por precipitação sequencial com acetona produzindo as frações R2F1 e RF31 (1 volume) e R2F2, e R3F2(2 volumes), as quais foram caracterizadas por eletroforese em gel de agarose (sistemas PDA e Ba/PDA). Baseado no comportamento eletroforético destas frações foram identificados heparina (R3F1), um híbrido tipo heparina sulfato/heparina (R2F1) e dermatam sulfato (R3F2) como os principais GAGS da lagosta. As massas moleculares das frações R2F1 e R3F1 foram estimadas em 11 e 16kDa, respectivamente. O híbrido tipo heparina sulfato/heparina foi caracterizado na fração R2F1 pela baixa suscetibilidade à ação isolada da heparinase I e degradação parcial pela ação conjunta de ambas heparinases, liberando principalmente dissacarídeos dissulfatados e N-sulfatados. Por outro lado, a fração R3F1 foi susceptível à ação isolada fs heparinase I, liberando como principal produto o dissacarídeo trissulfatado, e pela ação das heparinases I e II formou principalmente os dissacarídeos tri e dissulfatados, sendo este último em maior proporção. O menor teor de sulfato da heparina de crustáceo também foi indicado pela proporção molar de sulfato para hexosamina de 1.7:1.0, comparada à heparina bovina cuja proporção é de 2.6:1.0. Pelo ensaio da USP tanto R2F1 quanto R3F1 revelaram uma baixa atividade anticoagulante, comparada à heparina bovina. Entretanto, baseado no ensaio do APPT, ambas as frações apresentam uma melhor curva de inibição quando comparada à HBPM, indicando que tais glisocaminoglicanos atuam sobre a via intrínseca da cascata de coagulação. Além disso, a heparina da lagosta não desencadeou efeito hemorrágico nas condições testadas, o que abre novas... 2 2022-10-05T11:01:20Z 2022-10-05T11:01:20Z 2003. Dissertação 547.995 S586h DISSERT 44345 https://app.bczm.ufrn.br/home/#/item/44345 https://app.bczm.ufrn.br/home/#/item/44345 |
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Heparina Glicosaminoglicanos Dissertação Lagosta (Panulirus laevicauda) Silva, Luciana Pereira da. Chavante, Suely Ferreira. Universidade Federal do Rio Grande do Norte. Heparina e dermatam sulfato da lagosta Panulirus laevicauda / |
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Resumo : Os GAG extraídos da lagosta Panulirus laevicauda foram obtidos das frações R2 e R3 após proteólise dos tecidos, complexação com resina de troca iônica, e posterior eluição com NaCl 2,0M e 3,0M, respectivamente. Os GAGS existentes nas frações foram separados por precipitação sequencial com acetona produzindo as frações R2F1 e RF31 (1 volume) e R2F2, e R3F2(2 volumes), as quais foram caracterizadas por eletroforese em gel de agarose (sistemas PDA e Ba/PDA). Baseado no comportamento eletroforético destas frações foram identificados heparina (R3F1), um híbrido tipo heparina sulfato/heparina (R2F1) e dermatam sulfato (R3F2) como os principais GAGS da lagosta. As massas moleculares das frações R2F1 e R3F1 foram estimadas em 11 e 16kDa, respectivamente. O híbrido tipo heparina sulfato/heparina foi caracterizado na fração R2F1 pela baixa suscetibilidade à ação isolada da heparinase I e degradação parcial pela ação conjunta de ambas heparinases, liberando principalmente dissacarídeos dissulfatados e N-sulfatados. Por outro lado, a fração R3F1 foi susceptível à ação isolada fs heparinase I, liberando como principal produto o dissacarídeo trissulfatado, e pela ação das heparinases I e II formou principalmente os dissacarídeos tri e dissulfatados, sendo este último em maior proporção. O menor teor de sulfato da heparina de crustáceo também foi indicado pela proporção molar de sulfato para hexosamina de 1.7:1.0, comparada à heparina bovina cuja proporção é de 2.6:1.0. Pelo ensaio da USP tanto R2F1 quanto R3F1 revelaram uma baixa atividade anticoagulante, comparada à heparina bovina. Entretanto, baseado no ensaio do APPT, ambas as frações apresentam uma melhor curva de inibição quando comparada à HBPM, indicando que tais glisocaminoglicanos atuam sobre a via intrínseca da cascata de coagulação. Além disso, a heparina da lagosta não desencadeou efeito hemorrágico nas condições testadas, o que abre novas... |
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