Vacinas de DNA : um modelo experimental de imunização contra a Tripanosomose Africana /

Resumo:A Tripanosomose Africana (TA) é uma doença negligenciada, conhecida como doença do sono, causada pelo parasita denominado de Trypanosoma brucei. A TA é uma doença debilitante em humanos, gado e animais domésticos. Estratégias convencionais no desenvolvimento de vacinas contra a TA não represe...

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Detalhes bibliográficos
Principais autores:	Silva, Marcelo de Sousa da., Prazeres, Duarte Miguel França Teixeira dos., Monteiro, Gabriel António Amaro., Universidade Técnica de Lisboa.
Formato:	Dissertação
Publicado em:
Assuntos:	Vacinas - Doença de Chagas - Doença do sono - Trypasonoma brucei -
Endereço do item:	https://app.bczm.ufrn.br/home/#/item/233553
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spelling	oai:localhost:123456789-1562082022-10-06T15:37:05Z Vacinas de DNA : um modelo experimental de imunização contra a Tripanosomose Africana / Silva, Marcelo de Sousa da. Prazeres, Duarte Miguel França Teixeira dos. Monteiro, Gabriel António Amaro. Universidade Técnica de Lisboa. Vacinas - Doença de Chagas - Doença do sono - Trypasonoma brucei - Resumo:A Tripanosomose Africana (TA) é uma doença negligenciada, conhecida como doença do sono, causada pelo parasita denominado de Trypanosoma brucei. A TA é uma doença debilitante em humanos, gado e animais domésticos. Estratégias convencionais no desenvolvimento de vacinas contra a TA não representaram sucesso até então. Imunização com DNA tem se mostrado efetivo na geração de anticorpos, células T CD4ᶧ e células T citotóxicas CD8ᶧ, conferindo proteção contra uma variedade de doenças infecciosas. O objectivo deste trabalho foi desenvolver um modelo de vacinas de DNA contra a TA, baseado na clonagem de potenciais candidatos antigénicos em plasmídeo e indução da imunidade pela injeção deste genómico do Trypanosoma brucei foi purificado a partir de sangue de murganhos infectados. Primers especificos foram desenhados para amplificação génica por PGR. Três candidatos antigênicos do Trypanosoma brucei, denominados de ISG, SRA e TSA foram amplificados e clonados no plasmídeo pVAX1, contendo um promotor de CMV para expressão génica em células de eucariotas. Protocolos de imunização com os plasmídeos foram estudados em murganhos e a resposta imune mediada por anticorpos analisada. Animais CD-1 e Balb/C após a imunização com ISGpVAXI e nTSApVAXI produziram anticorpos IgG anti-tripanosoma, entretanto este fenómeno não foi capaz de induzir proteção quando os animais foram desafiados com as formas sanguíneas do Trypanosoma brucei brucei.#$&Abstract: African Trypanosomiasis (AT) is a neglected disease, commonly known as sleeping sickness, caused by protozoan parasites named Trypanosoma brucei. AT is an extremely debilitating disease in human, cattle, and domestic animals. Conventional vaccine strategies against AT have been tried before without success. DNA immunization has proved shown to be an effective mean of generating antibodies, CD4ᶧ T helper cells, and CD8ᶧ cytotoxic T lymphocytes responses, conferring protection against a wide range of infectious diseases. The aim of this work was the development of plasmid DNA vaccines against AT, based in the strategy of cloning antigenic candidate genes and induction of immune response with plasmid DNA injection. Genomic DNA from Trypanosoma brucei has been purified from blood of infected mice. Specific primers were designed for gene amplification by PCR. Three antigenic candidate genes from Trypanosoma brucei, named ISG, SRA, and TSA were amplified and cloned in plasmid pVAX1, which contains a CMV promoter for expression in eukaryotic systems. Immunization protocols with DNA vaccines encoding these genes were studied in mice and humoral immune response analysed. After immunization with ISGpVAXI and nTSApVAXI CD-1 and Balb/C mice produced IgG antibodies anti-trypanosoma. However, this immunization process was ineffective to protect them against the challenge assay with Trypanosoma brucei brucei parasites. 1 2022-10-06T15:37:05Z 2022-10-06T15:37:05Z 2006. Dissertação 615.371 S586v DISSERT 233553 https://app.bczm.ufrn.br/home/#/item/233553 https://app.bczm.ufrn.br/home/#/item/233553
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description	Resumo:A Tripanosomose Africana (TA) é uma doença negligenciada, conhecida como doença do sono, causada pelo parasita denominado de Trypanosoma brucei. A TA é uma doença debilitante em humanos, gado e animais domésticos. Estratégias convencionais no desenvolvimento de vacinas contra a TA não representaram sucesso até então. Imunização com DNA tem se mostrado efetivo na geração de anticorpos, células T CD4ᶧ e células T citotóxicas CD8ᶧ, conferindo proteção contra uma variedade de doenças infecciosas. O objectivo deste trabalho foi desenvolver um modelo de vacinas de DNA contra a TA, baseado na clonagem de potenciais candidatos antigénicos em plasmídeo e indução da imunidade pela injeção deste genómico do Trypanosoma brucei foi purificado a partir de sangue de murganhos infectados. Primers especificos foram desenhados para amplificação génica por PGR. Três candidatos antigênicos do Trypanosoma brucei, denominados de ISG, SRA e TSA foram amplificados e clonados no plasmídeo pVAX1, contendo um promotor de CMV para expressão génica em células de eucariotas. Protocolos de imunização com os plasmídeos foram estudados em murganhos e a resposta imune mediada por anticorpos analisada. Animais CD-1 e Balb/C após a imunização com ISGpVAXI e nTSApVAXI produziram anticorpos IgG anti-tripanosoma, entretanto este fenómeno não foi capaz de induzir proteção quando os animais foram desafiados com as formas sanguíneas do Trypanosoma brucei brucei.#$&Abstract: African Trypanosomiasis (AT) is a neglected disease, commonly known as sleeping sickness, caused by protozoan parasites named Trypanosoma brucei. AT is an extremely debilitating disease in human, cattle, and domestic animals. Conventional vaccine strategies against AT have been tried before without success. DNA immunization has proved shown to be an effective mean of generating antibodies, CD4ᶧ T helper cells, and CD8ᶧ cytotoxic T lymphocytes responses, conferring protection against a wide range of infectious diseases. The aim of this work was the development of plasmid DNA vaccines against AT, based in the strategy of cloning antigenic candidate genes and induction of immune response with plasmid DNA injection. Genomic DNA from Trypanosoma brucei has been purified from blood of infected mice. Specific primers were designed for gene amplification by PCR. Three antigenic candidate genes from Trypanosoma brucei, named ISG, SRA, and TSA were amplified and cloned in plasmid pVAX1, which contains a CMV promoter for expression in eukaryotic systems. Immunization protocols with DNA vaccines encoding these genes were studied in mice and humoral immune response analysed. After immunization with ISGpVAXI and nTSApVAXI CD-1 and Balb/C mice produced IgG antibodies anti-trypanosoma. However, this immunization process was ineffective to protect them against the challenge assay with Trypanosoma brucei brucei parasites.
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